美研|CMC系列(十五)：杂质制备及结构确证案例分享

杂质谱研究要周全的思量杂质的泉源、去向，，需要连系详细的反应监控及后处置惩罚监控来开展，，特殊是起始物料的杂质研究，，若是起始物料中的杂质研究不敷透彻，，那么起始物料的杂质就会有很大的可能性继续转达至后续的中心体。。

案例分享：对中心体的未知工艺杂质举行制备和结构确证

研究配景

客户委托对中心体M01的未知工艺杂质举行制备和结构确证。。该杂质LCMS不电离，，无法通过LCMS获得化合物的分子量，，在对制备液举行后处置惩罚时，，旋蒸和冻干都拿不到产品。。

? 中心体M01的ROS：

研究思绪

1、比照杂质及中心体的紫外光谱

2、制备情形

1）液相纯度大于98%；；；
；
2）waters SQD2碱性系统化合物不电离，，酸性系统也不电离；；；
；
3）制备液高温、室温旋蒸后都会消逝不见；；；
；
4）制备液冻干后，，检测不出峰。。

3、凭证以上，，可以肯定的以及推测可能的情形

1）从紫外判断，，未知杂质的母核肯定有萘环结构，，杂质和中心体M01的紫外吸收完全一致，，说明萘环没有毗连会导致紫外红移或者蓝移的基团。。
2）最有可能的是和萘环直接相连的亚甲基上面爆发了转变。。
3）不电离，，化合物没有ESI源可以电离的基团。。
4）旋蒸和冻干后液相检测都不出峰。。

4、SM01的ROS

5、制备液检测GCMS

检测发明杂质分子量是142.2，，比萘多了一个甲基，，凭证制备液GCMS的检测效果，，连系起始物料的ROS，，起始物料制备历程中可能会爆发副产品甲基萘，，随后对甲基萘举行调研。。

? 甲基萘的理化性子：
甲基萘是一种无色油状液体，，有类似萘的气息，，能与蒸气一同挥发，，易燃，，不溶于水，，易溶于乙醚和乙醇。。相对密度（20℃）1.025,沸点245℃，，闪点82.2℃。。

从甲基萘的理化性子，，可以相识到甲基萘可以随蒸汽一同挥发：甲基萘的极性小，，水溶性差，，制备液中有大宗的水保存，，在对制备液举行旋蒸和冻干处置惩罚时，，甲基萘会随着蒸汽同时挥发；；；
；这一点很主要，，关系到制备液的准确后处置惩罚方法。。

6、改变制备液后处置惩罚方法

◆ 制备液直接使用正己烷萃取，，充分振摇后取等体积上清液和下清液用等体积乙醇稀释至相同体积；；；
；
◆ 检测甲基萘的含量，，发明正己烷层溶液中甲基萘含量高于水层，，或许是5:1的比例；；；
；
◆ 取正己烷层旋蒸后处置惩罚，，取一滴旋蒸液加乙醇稀释后进样检测，，可以检测到杂质峰，，对中心体M01的未知杂质举行定位比照，，旋蒸液检测的出峰时间与M01中未知杂质出峰时间一致；；；
；
◆ 进而对旋蒸液举行GCMS检测（图1），，旋蒸液检测的分子量和制备液检测的分子量一致，，确定后处置惩罚要领，，制备液第一次萃取处置惩罚完后再举行第二次萃取，，镌汰样品损失，，拿到产品后举行核磁检测确认（图2），，确定杂质为1-甲基萘。。

图1：GCMS棒状图

图2：H-NMR

总 结

未知杂质研究是一个综合性事情，，需要的知识也是综合性的，，需要研究者能够凭证杂质和主因素的检测情形推测可能的结构转变，，好比凭证杂质和主因素的紫外光谱差别来判断杂质的共轭转变、凭证杂质的红外检测情形推断官能团转变、通过质谱确定未知杂质是否含有卤族元素（主要是Cl和Br）以及卤族元素的数目等，，还需要研究者有一定的有机化学功底，，凭证ROS推测反应可能保存的副产品，，连系杂质的检测情形综合来判断杂质的结构。。

美研|CMC系列回首

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