iTRAQ实验手艺效劳

iTRAQ手艺原理： 

iTRAQ试剂为可与氨基酸N端及赖氨酸侧链毗连的胺标记同重元素(isobaric)。。在质谱图中，，任何一种iTRAQ试剂标记的差别样本中的统一卵白质体现为相同的质荷比。。
在串联质谱中，，信号离子体现为差别质荷比(114～117)的峰，，因此，，凭证波峰的高度及面积，，可以获得卵白质的定量信息。。 

iTRAQ试剂结构：

iTRAQ试剂是一种小分子同重元素化学物质，，包括三部分：

一端是报告部分 reporter group；；；；；
另一端是肽反应部分 peptide reactive group；；；；；
中心部分是平衡部分 balance group。。

其中： reporter group：质量为114Da、115 Da、116 Da、117 Da，，因此iTRAQ试剂共四种。。
? peptide reactive group：将reporter group与肽N端及赖氨酸侧链毗连，，险些可以标记样本中所有卵白质。。
? balance group：质量为31 Da、30 Da、29 Da、28 Da，，使得四种iTRAQ试剂分子量均为145 Da，，包管iTRAQ标记的统一肽段m/z相同。。
图1 iTRAQ 试剂结构
 
综上：
    4个泉源差别的相同卵白样品在一级质谱上体现相同；；；；；
    Balance group在二级质谱爆发中性丧失；；；；；
    Reporter group 在二级质谱爆发４个报告离子，，划分是114、115、116和117；；；；；

操作流程：

iTRAQ手艺主要特点：

1.疏散能力强、剖析规模广
2.定性剖析效果可靠，，可以同时给出每一个组分的分子量和富厚的结构信息
3.MS具备高迅速度、检测限低
4.剖析时间快，，疏散效果好
5.自动化水平高
6.iTRAQ手艺不但可发明胞浆卵白，，尚有膜卵白、核卵白、胞外卵白7.iTRAQ手艺可检测出低品貌卵白、强碱性卵白、小于10KD或大于200KD的卵白