疼痛动物模子/大鼠疼痛模子

疼痛（伴 von Frey hairs 检测）

疼痛是个重大的神经病理与主观感受症状，，，，，，爆发的缘故原由多种多样，，，，，，近年来，，，，，，在疼痛和镇痛研究领域已普遍重视建设模拟临床患者急、慢性或一连性疼痛的实验模子。。。。疼痛动物模子建设的要领可以多种多样，，，，，，一样平常地，，，，，，有化学刺激性模子，，，，，，物理刺激性模子，，，，，，神经源性损伤模子，，，，，，内脏牵拉疼痛模子以及其他多种模子。。。。但要一个模子同时反应多种病因引起的疼痛是相当难题的，，，，，，实验者需针对研究的目的去选择或建设适用的疼痛模子。。。。现就近年来海内外普遍应用或新近建设的疼痛模子作一简要探讨。。。。

1、化学刺激法

化学刺激法制造的疼痛模子是现在研究最多、应用最普遍的的一类疼痛模子，，，，，，主要有炎性刺激致痛和药物刺激致痛两种。。。。

1.1 炎性刺激致痛

1.1.1 炎剂内脏痛模子

1.1.1.1炎剂扭体法常用小鼠，，，，，，腹腔注射0.6%冰乙酸0.2ml/只或0.05%酒石酸锑钾0.2ml/只致痛。。。。视察10~20min扭体反应的次数或泛起扭体反应的动物数，，，，，，盘算镇痛百分率。。。。本法适于筛选非麻醉性镇痛药，，，，，，尤其是筛选甾体抗炎药镇痛作用的一种敏感而轻盈的一种要领，，，，，，但缺乏特异性，，，，，，个体差别大，，，，，，故腹腔时的部位和操作手艺应只管坚持一致。。。。

1.1.1.2 蜂毒致结肠炎疼痛模子 在目视条件下将蜜蜂毒注入即时麻醉大鼠的乙状结肠黏膜下，，，，，，在一准时间规模内视察苏醒大鼠由于坛性内脏痛所致的主要性疼痛行为，，，，，，如舔咬下腹部及**区域，，，，，，腹部缩短，，，，，，身体舒展及全身缩短。。。。此法阻止了由于腹腔注射化学刺激物造成的腹壁躯体性痛因素的介入以及大面积的弥散性脏器、黏膜以及腹腔壁层的损伤，，，，，，具有行为反应特征显着、痛评分客观现实、切合临床症状、操作轻盈且重现性好之优点，，，，，，与福尔马林致痛相比照，，，，，，前者比后者第二相炎症反应显着且一连期长，，，，，，这对炎症性镇痛药的研究是至关主要的。。。。

1.1.2 致炎剂致局部枢纽肿胀疼痛模子 要领是选用适当的致炎剂，，，，，，于大鼠或小鼠后足跖或踝部皮下注射。。。。如注入后0.5~1h肿胀达峰值的鸡蛋清、5-HT、组织胺、缓激肽、右旋糖酐等短效致炎剂，，，，，，或在注入后2~4h肿胀达峰值的福尔马林（50μl4%）、交织菜胶（0.1ml0.5%）、琼脂、白陶土、酵母等中效致炎剂；
；；甲醛（0.2mg/50μl）、氮芥、结晶尿酸钠在注入24h后才抵达峰值，，，，，，一连约两周，，，，，，消退也晚，，，，，，为长效致炎剂。。。。注入以后造成枢纽或足跖肿胀，，，，，，测定足跖容积或枢纽周长。。。。

1.1.3佐剂枢纽炎模子其基本要领是在大鼠尾根部皮内或足跖部注射福氏完全佐剂,注射后原发病变为致炎局部的炎症反应，，，，，，致炎后8h炎症局部即泛起红肿疼痛，，，，，，18h可达岑岭，，，，，，一连6d左右，，，，，，以后逐渐减退，，，，，，一连数周、继发病变一样平常于致炎后10d左右泛起，，，，，，体现为全身多发性枢纽损害。。。。此模子与人的类风湿性枢纽炎很相似，，，，，，其造模特异性高，，，，，，假阳性率低,被以为是慢性痛最为理想的模子之一。。。。

1.1.4钾离子皮下透入或注射致炎性疼痛模子常用动物为兔与大鼠，，，，，，饱和KCl溶液，，，，，，经一定强度的直流电透入或直接注射进入动物的差别皮下部位，，，，，，引起疼痛。。。。一样平常以引起上述疼痛反应的电流强度（mA值）作为痛阈。。。。该模子主要用于药物或针刺在外周的镇痛机制。。。。

1.1.5 辣椒素静脉推注致偏头疼模子李树壮等用辣椒素静脉刺激和电刺激的要领，，，，，，造成大鼠硬脑膜内血浆卵白渗透，，，，，，建设神经源性炎症动物偏头痛模子。。。。

1.2 药物刺激致痛动物模子

1.2.1硝酸甘油注射致偏头疼模子大鼠，，，，，，皮下注射硝酸甘油10mg/kg，，，，，，造模后动物泛起双耳发红、前肢频仍挠头、活动增多等体现。。。？？？？？？赡芑砦，，，，，，硝酸甘油在体内天生NO，，，，，，NO通过强烈的扩张脑血管作用，，，，，，造成无菌性眼炎症；
；；另一方面NO具有神经毒性作用，，，，，，可引发三叉神经的血管反射，，，，，，诱发实验性偏头疼，，，，，，该模子具有经济、轻盈、相似性好，，，，，，适用性强等特点，，，，，，已被普遍用在偏头疼的研究领域。。。。

1.2.2利血平化低5-HT伴局部脑血管痉挛头痛模子要领小鼠，，，，，，皮下注射利血平10mg/kg，，，，，，共14d。。。。于第14天将小鼠麻醉，，，，，，大脑皮层注射血凝块2μl/只。。。。
；；砦グ防嗌窬葜屎慕呒晾侥芄挥辗⑵诽，，，，，，又局部注射血凝块可以诱发脑血管痉挛。。。。造模后，，，，，，小鼠凝血时间显着缩短，，，，，，痛阈值降低，，，，，，全血及脑内5-HT含量显着下降，，，，，，这些基本上反应了偏头疼的特点。。。。

1.2.3组胺、利血平与m-CPP[1-(3-氯苯基)]哌嗪头痛模子Olesen用一连给予组胺、利血平与m-CPP作为另一个实验性头痛模子，，，，，，提醒其中组胺作用最为显着，，，，，，它通过扩张血管作用的H1受体,并涉及NO通道而施展作用。。。。

2、物理刺激法

2.1 热刺激法

2.1.1 热板法选用雌性小鼠,用热板测痛仪丈量每鼠的痛阈（即痛反应情形潜在期,指小鼠触热板至舔后足的时间）。。。。比照组的痛阈按100%盘算，，，，，，求出给药组的痛阈提高率。。。。本法对组织损伤最小，，，，，，动物可重复使用，，，，，，且轻盈易行，，，，，，但对甾体类抗炎药不太敏感。。。。

2.1.2 辐射热刺激甩尾法小鼠或大鼠，，，，，，用全反射式影戏放映灯胆发出光来，，，，，，群集照射，，，，，，以启动光源至鼠尾急速摆动的时间为甩尾潜在期测痛阈，，，，，，盘算痛阈提高百分率。。。。该法装置简朴，，，，，，操作利便，，，，，，反应恒定、迅速，，，，，，能准确测出阈值及刺激强度。。。。适用于麻醉性及非麻醉性阵痛药物的筛选,是纯粹的脊髓反射。。。。

2.2.3 其他热刺激法 接纳一定功率之辐射热，，，，，，从下向上照射动物之脚底测定其回缩潜在期，，，，，，或接纳后脚浸泡要领测试一定温度下后脚回缩潜在期；
；；或接纳后脚浸泡要领测试一定温度下后脚回缩潜在期；
；；也有接纳差别温度的热探头刺激以视察后脚回缩阈值.

2.2 冷刺激法-冷板法

    将动物置于坚持在1℃~5℃金属板上,视察动物在一准时间内后脚缩短的次数及后脚坚持在空中的时间,以权衡动物对冷刺激的敏感性;carlton将后脚插入差别温度冷水中以视察后脚的回缩潜在期 ;最近也有应用丙酮及氯仿举行冷刺激的要领.

2.3 电刺激法

2.3.1 电刺激-嘶叫法常用小鼠尾刺激和家兔齿髓刺激的要领(以方波脉冲电刺激致痛),动物因疼痛可泛起嘶叫反应,以嘶叫反应为疼痛指标,视察镇痛作用,该要领轻盈易行,疼痛反应指标明确,重现性好,要领可靠,但个体差别较大。。。。

2.3.2 电刺激三叉神经偏头疼模子 麻醉大鼠,沿正中线切开皮肤,袒露颅骨,以前卤向后3.7 mm,矢状缝旁开2.9~3.1 mm处,左右各钻一直径2 mm的小空,下置不锈钢电极,经股静脉插管,深度为颅骨下9.2~9.7 mm,给于右侧神经电刺激(1.2 mA,5 Hz),一连5 min。。。。一次性给予I标记人血清白卵白(125I-HAS),效果电刺增添了刺激侧硬脑膜内125I-HAS的渗透；
；；刺激侧血浆卵白的渗透量随刺激后时间的延伸而逐渐镌汰，，，，，，而非刺激侧I-HAS的渗透水平直到刺激后180 min未爆发显着波动此模子造成大鼠硬脑膜内血浆卵白渗透，，，，，，是一乐成的神经源性动物疼痛模子。。。。

2.4 机械性痛觉过敏模子

    一样平常可用软毛刷或铅笔头轻触动物的皮毛以测试动物对轻触觉刺激的反应，，，，，，现在较常用的要领为应用系列的Vonfry针丝榨取皮肤以爆发差别水平的压力。。。？？？？？？捎谜庵终胨堪创有〉执锏乃承虼碳ざ锝诺准吐妓跬酥淬兄担ɑ荡碳せ厮蹉兄担，，，，，，或以一定压力的Vonfry针丝以一定频率的重复刺激测试厥后腿缩短频率，，，，，，动物对这些刺激常体现为缩脚、逃跑、嘶叫及攻击性行为。。。。

3、神经源性损伤模子

3.1 神经瘤模子是20世纪70年月，，，，，，由Wall及其同事首先先容的神经病理疼痛模子。。。。要领是：大鼠，，，，，，麻醉，，，，，，于一侧后肢大腿外侧切开皮肤，，，，，，疏散肌肉，，，，，，袒露坐骨神经干，，，，，，在大腿中止，，，，，，用细细线紧扎神经干，，，，，，然后在结扎的远断完全切开神经干，，，，，，再将断面的近中止神经干5~8 mm植入一端密闭的医用聚乙烯管内，，，，，，最后缝合皮肤。。。。通常在术后9~40 d，，，，，，切断的轴突形成神经瘤，，，，，，并长出枝芽。。。。该模子主要模拟临床截肢后的幻肢痛和神经全切断以后的症状。。。。动物常体现为“自残”（self-intilate）征象，，，，，，只管不知道自残是否与举行性病理疼痛有关，，，，，，但这一模子已被普遍用于外周神经病理机制的研究，，，，，，并取得了长足的希望。。。。

3.2 背根节慢性榨取实验模子 (CCD)麻醉大鼠,于背部正中L4~L6部位切开皮肤,疏散脊椎一侧肌肉,用L型探针头按一定偏向插入L5椎间孔约4 mm,然后抽出针头再将不锈钢针(长4 mm,直径0.5~0.8 mm)沿探针进入偏向与途径插入L5椎间孔。。。。本模子的特点是受损的DRG神经元泛起自觉放电的频率较高,并泛起多种放电节律形式,这一神经元超兴奋的客观指标,为研究痛敏的细胞机制以及痛信号的起搏机制提供了有用的手段,该模子仍保存外周神经的传出与传入功效,与临床椎间孔狭窄和椎间盘突出等引起腰背痛和坐骨神经痛的情形相似。。。。

3.3 慢性结扎损伤模子（CCI）

    大鼠袒露坐骨神经干,作3~4个轻度结扎,间距1mm,结扎强度以引起小腿肌肉轻度颤抖为宜,动物于5~7d最先泛起自觉痛、痛敏、痛觉异常等，，，，，，因此类似临床的慢性疼痛症状，，，，，，近年已成为应用最为普遍的神经病的疼痛模子。。。。

3.4 段性脊神经结扎损伤模子

将大鼠L5和/或L6脊神经切断或结扎,可以造成坐骨神经的部分损伤,这种模子具有较明确的损伤定量和脊髓阶段定位,并且有利于研究受损与未受损神经纤维在疼痛机制中的作用。。。。

3.5 外周神经冰冻损伤模子

Deleo接纳-60℃ 的冰冻探头直接接触坐骨神经干而造成坐骨神经冰冻损伤,该模子适用于研究暂时性外周神损伤引起的神经源性疼痛。。。。

3.6 其他神经源性损伤模子 

    除以上模子外,尚有多种通过差别损伤要领制备的神经病理疼痛模子。。。。例如,切断一侧坐骨神经(1/3),引起双侧后肢痛敏;切断支配区的交感神经,可以消除异常疼痛反应;在一侧紧靠DRG的外周端,结扎1或2支腰部脊神经,可引起术侧后肢长达5~10周的疼痛反应,其优点是损伤与正常的脊神经完全脱离,弱点是手术要切除L5或L6横突,波及规模较大。。。。

4、内脏牵拉痛动物模子

现在海内以有不少内脏牵拉造成的疼痛模子,造模的要领有:用气囊扩张胃;用套塑料管的线绳拉胃;电刺激内脏大神经等。。。。作为内脏牵拉反应的客观指标有:差别水平中枢的诱发电位,内脏大神经的反射性放电、肋间神经放电、动脉血压、食道运动、动物的胃肠外翻、挣扎、吼叫等。。。。这些模子从差别角度给研究内脏疼痛积累了资料。。。。